这条线路串联起南京市高淳、溧水、江宁3个区的6个党史教育基地。线路起点为新四军第一支队司令部旧址,位于高淳老街吴氏宗祠内。1938年5月中旬,为开展敌后游击战争,新四军第一支队在司令员陈毅率领下,从皖南岩寺地区出发东进茅山,于6月4日凌晨抵达高淳县城,第一支队司令部就设在吴氏宗祠。
线路第二站的新四军驻高淳办事处旧址同样位于高淳老街。1938年8月,新四军第一支队政治部决定组成民运工作组,在高淳县城开展地方工作,对外称新四军驻高淳办事处。
红色堡垒西舍位于高淳桠溪街道西舍自然村。红色李巷位于溧水区白马镇李巷自然村。新四军第一支队指挥部旧址和云台山抗日烈士陵园都位于江宁区。其中新四军第一支队指挥部旧址位于横溪街道横山社区上庄村,抗战期间,陈毅、粟裕等将领,在这里制定了一系列抗击日寇、保卫家园的计划及斗争的策略。云台山抗日烈士陵园位于横溪街道云台村,为纪念在云台山突围战中牺牲的新四军抗日烈士修建。